[目的]探讨猪流行性腹泻病毒（Porcine epic Dreash，PEDV）M蛋白基因的序列结构特征和原核表达。[方法]根据已发表的PEDVM基因序列，设计一对特异性引物。以从阳性材料中提取的RNA为模板，RT-PCR扩增克隆了PEDV截短的M基因（rM），并通过在线生物信息学软件预测RM蛋白的结构特征。截短的M基因被克隆到原核表达载体、pET－28a（+）以构建原核表达质粒pET－28a－rM。确定了正确的pET－28a－rM转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，并成功构建了重组菌株BL21（pET－28a－RM）。重组菌株经IPTG诱导，在重组蛋白优化表达条件。经亲和层析纯化后，用SDS-PAGE和Western　blotting检测重组蛋白，同时制备兔抗rM多克隆抗体。【结果】克隆大小为366。bpM基因由121个氨基酸组成，预测分子量约为12.8ku。蛋白质的二级结构由无规则卷曲、延伸链、-角和-螺旋组成，分别占48.76%、33.88%、9.09%和8.26%。该蛋白不含信号肽，但具有跨膜区，包含21个磷酸化位点。SDS-PAGE结果显示，重组蛋白的大小约为15 Ku，以包涵体蛋白的形式存在。37,1 mmol/L IPTG诱导12小时后，蛋白质含量最高。Western　blotting试验结果表明，重组蛋白和PEDV阳性血清具有良好的反应原性性，用纯化的重组蛋白免疫新西兰和大白兔获得的高免血清效价高于151 200。[结论]成功克隆了PEDV截短的M基因，并对生物信息学中的RM蛋白进行了分析，获得了高纯度的RM蛋白，为猪流行性腹泻生物制品的开发和检测奠定了基础。