本研究的目的是建立一种间接ELISA（indirect　ELISA、iE、LISA）方法，用于灵敏、快速地诊断新的鸭呼肠孤病毒（NDRV）抗体，为水禽养殖业提供一种科学、有效的检测方法。此前有报道称，C蛋白是通过沉淀表达的。因此，本研究利用大肠杆菌密码子偏性规律优化其基因序列进行原核表达，纯化出高纯度的可溶性C蛋白。然后用滴定法方阵测定样品的浓度和稀释度，初步建立了iELISAndrv的检测方法。分别分析84份阳性和180份阴性质控血清，构建受试者工作特征曲线（ROC）曲线，通过Youden指数选择灵敏度和特异性最好的P值作为阴阳临界值。然后通过质控阴性和阳性血清评估试剂盒的批内和批间重复性。用本研究建立的全病毒包被iELISA法和实验室同时检测质控血清，用滴定法方阵测定各组分的条件为：C蛋白包被浓度为0.5g/孔，血清稀释度为1:320。ROC曲线已建成的较低区域为1.00，阴阳的最佳临界值为0.076。该临界值的敏感性和特异性为100%。整个病毒包衣板与C蛋白包被板的符合率为100%，但前者的D450价值较低，C蛋白包被板弥补了这一缺陷。本研究为iELISA提供了一种特异、灵敏的抗体检测方法