高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定海产品中5种硒形态的含量
作者:朱羽庄; 梅光明; 杨盈悦; 顾捷; 孟春英
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制备的冷冻干燥海产品样品为0.2g(精确至0.0001g),在Aristole 8.0水溶液系统的50和180R·Eiffel塔、min漩涡3和min离心10的条件下,在30个mg木瓜蛋白酶(800U·mg-1)中放置12h。获得的上清液通过0.22m滤膜过滤,Agilent ZORBAX SB-AQ色谱柱(250mm,4.6mm,5m)为固定相,柠檬酸溶液(pH4.75)在10mmol-L-1为流动相。在0.6ml·min-1下进行等效洗脱。在11个min可实现五种硒形态的分离,然后电感耦合等离子体质谱法用于测定硒酸盐(Se6+)、亚硒酸盐(Se4+)、甲基硒代半胱氨酸(Me-Se-Cys)、硒代蛋氨酸(Se-Met)和硒代乙硫氨酸(Se等)的含量。结果表明,五种硒形态的标准曲线线性范围在500g·L-1以内,检出限(3S/N)的标准曲线线性范围为1.231~2.423g·L-1。根据标准加入法,在三个浓度水平下,海鲜样品的回收率为81.3%~118%,日内相对标准偏差(n=6)和相对标准偏差(n=6)的测量值小于9.0%。结果表明,硒代蛋氨酸小黄鱼和带鱼的检测结果高于文献报道的大西洋鲑鱼和大西洋鳕鱼,表明在中国食用小黄鱼和带鱼可以为居民补充更多的高水平硒代蛋氨酸。此外,口虾蛄也是补充硒代蛋氨酸的重要来源。