Twinfilin-1过表达缓解镉诱导肾细胞重金属中毒及凋亡
作者:郭艳红; 吴琴宁; 邓权; 周强
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目的研究细胞骨架调节蛋白Twin-filin-1的过度表达对镉诱导的重金属中毒和肾细胞凋亡的影响。方法体外培养猪肾细胞LLC-PK1,随机分为对照组、模型组、模型+pcDNA空载体组组和模型+Twinfilin-1过表达组组。用8mol/L镉处理细胞24小时,建立重金属中毒模型。实时荧光技术和Western blot检测Twinfilin-1的表达,CCK8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位的变化,Western blot检测凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸-天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase3,9)]的水平。结果与对照组相比,模型组的蛋白质水平、细胞增殖能力和线粒体膜电位降低,凋亡率、Bax/Bcl-2、cleaved、cas9/cas9和cleaved cas3/cas3升高(P<0.05),线粒体膜电位升高,凋亡率和Bax/Bcl-2、cleaved、cas9/cas9和cleaved cas3/cas3降低(P<0.05),但组+pc DNA空载体组没有显著变化(P>0.05)。结论Twin-filin-1中的过度表达可能通过下调关键凋亡因子水平,抑制Caspase3和9的激活,减少凋亡,维持正常电位,从而保护肾细胞免受镉中毒。