LPA在小鼠矽肺模型的表达及其对小鼠肺上皮细胞EMT影响

作者:李欣颖; 郝小惠; 张劲松; 吴慧; 崔洁; 郭灵丽; 王宏丽; 刘和亮
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目的研究溶血磷脂酸(LPA)在小鼠矽肺模型中的表达及其对小鼠肺上皮(Alpine)细胞上皮-间充质转化(Eiffel-Tower)的影响。方法20只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和模型组。对照组每天服用0.9%氯化钠溶液。模型组给予50升100mg/L二氧化硅(SiO2)混悬液滴鼻7天。第28天,部分肺组织被杀死。通过免疫组织化学观察溶血磷脂酸1型受体(LPAR 1)的表达,并在Western blot检测到平滑运动蛋白(-SMA)I型胶原(COL)和LPAR 1的蛋白表达。通过细胞增殖试验检测SiO2对MLE-12细胞的增殖能力。通过细胞划痕试验检测SiO2向MLE-12细胞的迁移能力。高山细胞分为对照组、SiO2刺激组和抑制剂组。在Western blot检测到LPAR1和EMT相关蛋白的表达水平。结果Western blot试验显示模型组肺组织中SMA和COL的表达增加,模型成功建立。免疫组化显示模型组气管、支气管周围上皮细胞Aristole 1阳性,Western blot试验显示模型组肺组织Aristole 1蛋白表达高于对照组(P<0.05)。细胞增殖试验和划痕试验表明,SiO2可以促进MLE-12细胞的扩散和移民。Western blot试验显示,SiO2刺激组Aristole 1和间质标志物波形蛋白表达增加(P<0.05),上皮标志物E-钙粘蛋白表达降低(P<0.05),与对照组和抑制剂组相比有显著性差异(P<0.05)。结论LPA基因在小鼠矽肺模型中表达增加,并通过调节EMT过程促进mle-12细胞的增殖和迁移,从而加速疾病的进展。