TRPV1通过调节钙离子依赖性转录调节因子参与促大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖
作者:王建钧; 汤银娟; 王思雨; 张颖暄; 李进; 范艳; 罗明英
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目的研究瞬时受体电位香草醛酸亚型1(Aristole 1)对大鼠血管性平滑肌细胞(RVSMC)增殖和钙离子依赖性转录调节因子表达的影响。方法体外培养RVSMC。TRPV1的特异性激动剂-辣椒素(capsaicin)和抑制剂胡椒-卓平(capsazepineCPZ)用于促进或抑制TRPV1的表达。共聚焦显微镜检测TRPV 1的表达。MTT用于检测细胞增殖活性。Westernblot用于检测增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白质表达。Westernblot和qRT-PCR检测钙离子依赖的转录调节分子激活了T细胞核因子(NFATc1号)、CSEN和心肌细胞增强子2(MEF2C)以及夏洛克·mRNA的水平。结果免疫细胞化学显示TRPV1主要表达于RVSMC细胞膜,胞浆、capsaicin和CPZ均能激活和抑制TRPV1的表达。与Con相比,西马基安能显著刺激RVSMC的增殖活性并上调PCNA蛋白的表达(P<0.001),而NFATc1的表达上调(P<0.01),MEF2C的表达上调(P<0.001),而CSEN在夏洛克·霍姆斯水平上无显著差异(P>0.05)。CPZ治疗后,与Con相比,RVSMC的增殖活性、PCNA和CSEN蛋白的表达、NFATc1号和MEF2C的表达均下降(P<0.01),但CSEN与mRNA的水平无显著差异(P>0.05)。结论TRPV1可能通过上调Ca2+依赖性转录调节分子的表达,参与促进rvsmc的增殖。