缺氧预处理人华通胶间充质干细胞条件上清对心肌缺血再灌注损伤的作用及机制
作者:李艳; 张燕; 张宁坤; 陈宇
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背景:间充质干细胞主要通过旁分泌作用改善组织损伤,低氧预处理后旁分泌作用增强。然而,人华通胶间充质干细胞缺氧预处理后的条件上清液对心肌缺血的影响及其机制仍需进一步研究。目的:探讨低氧预处理对人华通胶间充质干细胞心肌缺血的影响及其机制。方法:采用常氧法和低氧处理人华通胶间充质干细胞法获得条件反射波。通过缺氧-复氧和无血清培养大鼠H9c2细胞6小时,以模拟体内心肌缺血。再灌注损伤套件检测了乳酸脱氢酶在H9C2细胞文化中的生存能力。将大鼠H9c2细胞分为四组:常氧培养组、模型组、常氧上清液组和低氧上清液组。在常氧和缺氧的上清进行24小时干预后,在流式细胞仪检测到凋亡率,在Western blot检测到H9c2细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和自噬相关蛋白beclin-1、p62和LC3的表达。结果与结论:(1)缺氧-复氧-无血清处理和加入人华通胶间充质干细胞条件培养上清液后,H9C2细胞形态无明显变化。(2) 与常氧培养组相比,模型组H9c2细胞上清液中乳酸脱氢酶活性显著升高,加入两种人类华通胶间充质干细胞条件培养上清液后,乳酸脱氢酶的活性降低。(3) 与模型组相比,常氧和缺氧上清液组H9c2细胞凋亡减少,Bax、beclin-1和LC3蛋白表达减少,p62蛋白表达增加,缺氧上清液组的变化明显高于常氧上清液组。(4) 结果表明,低氧预处理人华通胶间充质干细胞条件上清液能减少心肌缺血和再灌注损伤引起的H9C2细胞凋亡,其保护作用可能与其抑制自噬有关。