PCV-2、PCV-3、PCV-4三重PCR鉴别检测方法的建立与应用
作者:王勤; 欧云文; 汪洋; 潘琴; 刘俐君; 何博
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为了建立猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪圆环病毒3型(PCV-3)和猪圆环病毒4型(PCV-4)的快速鉴定方法,设计并合成了PCV-2、PCV-3和PCV-4特异性鉴定和检测引物。通过优化一步三重RT-PCR鉴定反应条件和PCV-3、PCV-4中三重PCR检测方法,建立了PCV-2、PCV-3和PCV-4。该方法可分别扩增216bp、415bp、678 BP和216bp/415bp/678bp,用于PCV-2、PCV3号、PCV4号、PCV2号/pcv-3/PCV-4。PRV人、PPV、PRRSV、CSFV、PEDV和TGEV为阴性,PCV-2、PCV-3和PCV-4的最低检测量分别为1.0102拷贝/L、1.0103拷贝/L和1.0103拷贝/L。PCV2号、PCV3号和PCV4号的单PCR法符合率为100%。85例临床标本中,PCV-2、PCV-3、PCV-4阳性率分别为21.17%、14.12%和4.71%。结果表明,建立的PCV-2、PCV-3和PCV-4三重PCR鉴别检测方法具有良好的特异性、敏感性、准确性和临床适用性,为PCV-2、PCV-3和PCV-4的临床鉴别诊断提供了一种简单、快速的分子生物学检测技术。