目的是利用YE1－BE3－FNLS载体对猪的CD163基因进行c>T单碱基突变，形成TAA终止密码子，从而提前终止CD163基因的翻译。利用该网站，在第7外显子猪CD163基因中筛选了一个高效的sgRNA序列，使其与C5基因座一致，C5随后的两个碱基是AA，CAA与起始密码子和ATG之间的碱基是3的整数倍。FNLS载体的PCR扩增、CD163－sgRNA和YE1-be3-APOBEC－Cas9n－UGI片段在体外转录，形成CD163－sgRNA和APOBEC－Cas9n－UGI　mRNA。猪卵母细胞体外培养并进行孤雌激活。显微操作仪将孤雌生殖胚胎注射到CD163－sgRNA和APOBEC－Cas9n－UGI　mRNA。胚胎发育到囊胚期后，提取胚胎基因组。DNA对PCR扩增的单碱基编辑区进行了排序。结果表明，从49个候选sgRNA中成功地选出了一个CD163sgRNA，PCR成功地扩增了CD163－sgRNA和APOBEC－Cas9n－UGI的片段，注射到CD163－sgRNA和APOBEC－Cas9n－UGI　mRNA的猪的孤雌胚胎发育到2~2个4细胞期。经过PCR扩增和产物测序，发现CD163基因第七外显子12个胚胎的预期位点C（num1479）大于t，单碱基编辑效率约为60%。CD163－sgRNA的偏离目标分析表明，在三个碱基不匹配的情况下，CD163sgRNA有五个偏离目标的区域。经PCR扩增和sanger测序分析，发现这五个区域没有C>t突变。在本研究中，我们使用YE1-be3FNLS工具在胚胎水平编辑猪CD163基因的单碱基，并成功地将该基因的第7外显子预期位点（num1479）C更改为t，从而使密码子CAA成为TAA，从而提前终止CD163基因的翻译。