大别山白头翁组织培养外植体选择与消毒技术优化
作者:黄萍; 张佳佳; 窦娜; 蒋素华
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以河南大别山(chinensisPulsatilla)野生白头翁为材料,选择幼叶、中叶片和中叶柄三个外植体,分别用75%乙醇+2%次氯酸钠和20%过氧化氢+2%次氯酸钠进行两组正交试验。比较各种因素对消毒效果的影响,找出外植体与消毒的最佳组合。结果表明,外植体类型是影响消毒效果的最关键因素。从浅绿色到绿色的中间叶是最好的外植体,污染率最低(7.4%),愈合率最高(88.9%),速度更快。在消毒过程中,幼叶容易受伤和褐变,愈合率低于中叶,但高于中叶柄。中叶柄的污染率最高(41.7%),愈合率最低(12.5%),总体而言,叶片的消毒和诱导效果优于叶柄。2%次氯酸钠和75%乙醇的组合消毒效果最好,是白头翁叶片消毒的首选。当使用20%过氧化氢消毒时,外植体材料严重褐变。消毒的最佳组合为:中叶+75%乙醇20秒+2%次氯酸钠8min,或中叶+75%乙醇20秒+2%次氯酸钠12min。