分别为非洲猪瘟病毒B646L、mGF505-2r和CD2v基因设计引物和探针。在优化条件后，建立了基于TaqMan探针技术的三重检测方法。结果表明，本研究建立的三重荧光定量PCR检测方法与猪场常见的核酸没有交叉反应，且具有良好的特异性。GF505-2r和CD2v基因的最低检测限分别为6.5、8.0和14.0拷贝/L。该方法在10~1~10~7拷贝/L模板范围内具有良好的稳定性。组间变异系数为0.05%～2.68%，组内变异系数为0.10%～1.17%。对临床核酸样本的进一步检测表明，该方法与OIE推荐的检测方法非常一致。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒野毒株和荧光定量PCR基因缺失菌株的鉴定和检测方法，为临床监测和诊断提供了良好的技术支持。