[目的]建立药食同源海藻羊栖菜中抑制乙酰胆碱酯酶活性成分（Acetylcholinesterase、AChE）的最佳提取工艺，并探索主要活性成分的特定化学成分。[方法]以质量浓度为1mg/ml的乙酰胆碱酯酶抑制率　　提取物的质量为指标，在溶剂比、固液体积比、超声时间和提取次数四个单因素水平下比较AChE活性成分的提取效果，确定各单因素的最佳水平范围，然后通过正交实验优化提取工艺条件。在最佳提取工艺条件下提取并制备粗提物。粗提取物由硅胶柱色谱法和薄层层析分离纯化，并追踪其活性成分。[结果]羊栖菜抑制AChE活性成分的最佳提取条件为：溶剂乙酸乙酯与石油醚的体积比为55，料液质量（g）体积比为110，超声时间为30，min，提取次数为3次。在此条件下，相应提取物质量浓度为1 mg/ml时，乙酰胆碱酯酶抑制率（%）提取物质量（g）的值为7.078 1.038。从粗提取物中分离出两种具有AChE抑制活性的组分Fr2和Fr3。主要成分是脂肪酸，如花生四烯酸、亚油酸和油酸。Fr3也含有多种烷烃，比如十四烷。抑制IC50值分别为2.69 mg/ml和5.31 mg/ml。[结论]以本研究确定的乙酸乙酯混合溶剂为基础的超声提取工艺可获得高收率的羊栖菜抑菌活性成分。其主要成分为脂肪酸，在改善记忆方面可能有一定的应用价值。