薯蓣皂苷对高糖诱导的视网膜色素上皮细胞损伤的保护作用
目的研究薯蓣皂苷(Dio)对高糖(HG)诱导的视网膜色素上皮(RPE)细胞损伤的保护作用,并分析其机制。方法采用细胞计数试剂8法(CCK-8法)筛选无细胞毒性的葡萄糖浓度和Dio剂量范围。分别将Aristole-1和Aristole-1治疗组分为mmol低剂量组和mmol高剂量组(mmol高剂量组分别为48小时,mmol高剂量组分别为48小时和48小时)。用CCK-8法检测细胞活性。annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡。荧光探针法检测活性氧(ROS)一级。丙二醛(MDA)水平通过试剂盒法检测过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶的GSH-PX活性。JC-1染色检测线粒体膜电位。检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、cleaved、Caspase-3和Yes相关蛋白的表达水平(YAP)。免疫荧光法观察了YAP的表情。结果选择的葡萄糖浓度为50mmol·L-1,Dio的非细胞毒性剂量分别为0.5mmol·L-1、2.0mmol·L-1和8.0mmol·L-1。与对照组相比,CAT和YAP的细胞活性、线粒体膜电位、GSH-PX活性以及Bcl-2蛋白和YAP的蛋白表达水平显著降低(均P<0.001),而凋亡水平、ROS和MDA以及cleaved的蛋白表达水平均显著降低,在高剂量Dio治疗组中,Caspase-3蛋白和Bax显著增加(均P<0.001),CAT和YAP的细胞活性、线粒体膜电位、GSH-PX活性、Bcl-2蛋白和YAP的蛋白表达水平显著增加(均P<0.05),ROS和MDA的凋亡水平以及cleaved的蛋白表达水平显著增加,Caspase-3蛋白和Bax以剂量依赖性方式显著降低(均P<0.05)。结论Dio通过激活Polish信号减少和抑制线粒体介导的细胞凋亡,从而减轻HG对RPE细胞的损伤。