宫颈癌组织中circDENND4C的表达对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响
目的研究环状RNADENN/MADD域内含蛋白4C(circDENND4C)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法收集41例宫颈癌患者的癌组织和癌旁组织,实时检测定量聚合酶链反应circDENND4C和miR-4465(RTqPCR)的表达。HeLa细胞的体外培养和双重荧光素酶报告基因实验证实了circDENND4C和miR-4465之间的调节关系。将HeLa细胞分为正常对照组(NC)、小干扰RNA阴性对照组(Si NC)、circDENND4C小干扰RNA(si-circDENND4C)组、模拟对照组(MIR NC)、miR-4465组、si-circDENND4C+抑制剂阴性序列(反MIR NC)组和si-circDENND4C+miR-4465抑制剂(anti-miR-4465)组。通过四种噻唑蓝(MTT)方法检测细胞增殖,通过Transwell检测细胞迁移和入侵,Westernblot检测Ki-67和基质金属蛋白酶细胞2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达。结果circDENND4C蛋白在宫颈癌中的表达显著高于邻近组织(P<0.05),miR-4465的表达显著低于邻近组织(P<0.05)。circDENND4C脉以HeLa细胞为代表。在Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达量,si-circDENND4C组HeLa细胞光密度(OD)的价值、移民数量、入侵数量和细胞数量显著低于si-NC组(P<0.05)。miR-4465组HeLa细胞、OD值、Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达量的移民和入侵人数显著低于miR-NC组(P<0.05)。si-circDENND4C+anti-miR-4465组HeLa细胞、OD值、Ki-67、MMP-2和MMP-9蛋白表达量的移民和入侵人数显著高于si-circDENND4C+anti-miR-NC组(P<0.05)。结论circDENND4C在宫颈癌组织中的表达增加,可通过miR-4465的负调控促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭。