CYB5D2对乳腺癌皮下移植瘤模型大鼠肿瘤生长的影响
[目的]研究CYB5D2对乳腺癌皮下移植瘤模型大鼠肿瘤生长的影响。方法利用乳腺癌MCF-7细胞系建立裸鼠乳腺癌皮下移植瘤动物模型。将含有CYB5D2表达的质粒稳定转染MCF-7细胞并在多个点注射。将稳定转染的细胞皮下注射到裸鼠体内作为观察组。同时将shrna-cyb5d2阴性质粒设为阴性对照组,PBS为空白对照组。测量各组大鼠的肿瘤体积和质量。在建立裸鼠转移模型后,处死小鼠,用QRT-CPR法检测肿瘤组织中CYB5D2-mRNA蛋白的表达水平。Western Blot法检测到上皮间充质转化(EMT)标记物在裸鼠转移组织中的表达,用酶联免疫吸附试验检测裸鼠转移细胞上清液中MMP-2和MMP-9的含量。结果]观察组转移瘤的平均体积和质量明显低于阴性组和空白组(P<0.05),阴性组和空白组裸鼠体内转移瘤的体积和质量无显著性差异(P>0.05)。从实验小鼠中提取肿瘤组织的总含量。QRT心肺复苏法显示观察组肿瘤组织含量明显高于阴性组和空白对照组(P<0.05),但阴性组与空白组之间无显著性差异(P>0.05)。Western Blot法检测结果显示,观察组转移瘤组织中e-Aristole和catenin蛋白的表达水平显著高于阴性组和空白组(P<0.05),而n-Aristole和Snail蛋白的表达水平显著低于阴性组和空白组(P<0.05)。阴性组和空白组之间e-cadherin、连环蛋白、n-cadherin和Snail蛋白的表达无显著性差异(P>0.05)。观察组转移性肿瘤细胞上清液中MMP-2和MMP-9的水平显著低于阴性组和空白组(P<0.05),但阴性组和对照组之间的MMP-2和MMP-9水平无显著差异(P>0.05)。结论]CYB5D2基因上调可有效抑制乳腺癌皮下移植模型大鼠肿瘤的生长。据推测,CYB5D2基因的上调可能通过下调n-cadherin、Snail、MMP2和MMP9,上调E-钙粘蛋白和catenin来逆转EMT的抗肿瘤作用。