胃腺癌核酸适配体的筛选与特异性研究
作者:郭圆斌; 王朝霞; 刘秀娟; 冀巧梅; 石明; 李健; 刘志伟; 栗坤
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核酸适配体可以作为分子探针胃腺癌的早期诊断和治疗基地,具有广阔的应用前景。在这个实验中,系列SELEX(SER-SELEX)技术被用来筛选核酸适配体的胃腺癌。通过对候选适体二级结构的分析,二级结构主要是茎环结构。圆二色谱的分析显示,七名候选人核酸适配体表现出右手螺旋特征。通过荧光定量核酸扩增检测系统(QPCR)检测候选核酸适配体与胃腺癌靶的亲和力,结果表明候选核酸适配体的浓度梯度与Ct值呈正相关,亲和力常数为纳摩尔水平。q-PCR法和量子点法被用来验证候选核酸适配体识别目标的特异性。结果表明,Apt-101对该靶点具有较高的亲和力和特异性。Apt-101境内解离常数(Kd值)余额为6.4441.128nmol/l,特异性检测阳性率70%以上。