为了研究紫花苜蓿苜蓿（Medicago sativa L.）对辐射和高温胁迫的生理反应，用800株Gy和600株Gy60Co－辐射苜蓿种子的第二代高植物突变体植株以及未经辐射的苜蓿种子植物（G3、G4、CK）的叶片愈伤组织分化苗模拟了40次高温胁迫（时间1、2、3、4天），分别测定了苜蓿分化苗在高温胁迫下的存活率和8项抗性生理指标，并计算了8项指标的综合D值，综合分析了3组分化苗的耐热性。结果表明，高温胁迫40d后，CK分化苗的成活率为64%，当高温胁迫温度高于40d和超过4d时，分化苗的成活率受到严重影响。在高温胁迫下，三组的分化、可溶性糖、脯氨酸酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶酶活性均随胁迫时间的延长先升高后降低，而过氧化氢酶酶活性降低，可溶性糖、脯氨酸酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶酶活性降低，与对照组相比，丙二醛、过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活动分别增加了235.74%、79.21%、323.65%、30.10%、18.09%、82.87%和350.91%，过氧化氢酶的活动减少了64.52%。8项生理生化指标的综合D值分析表明，三组分化苗的耐热性为G3>G4>CK。一定剂量的辐射处理可以提高苜蓿分化苗的抗性。