目的研究免疫标记物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和增殖指数（Ki67）不同固定时间对脑胶质瘤标本免疫组织化学染色结果的影响，以及GFAP和Ki67阳性表达的差异。方法回顾性收集2018年1月至2019年12月71例脑胶质瘤肿瘤标本，肿瘤直径2cm。从每个标本中取出6个肿瘤组织，大小分别为1个cm、1个cm和0.2个cm。用4%甲醛固定4小时、24小时、48小时、96小时、7天和14d后，对GFAP和Ki67进行免疫组织化学染色，以比较不同固定时间对GFAP和Ki67阳性率的影响。结果固定4h、24h、48h、96h、7d和14d后，GFAP的有效阳性率分别为63.38%、97.18%、95.77%、92.95%、90.14%和77.46%（2=51.802，P<0.001）。Ki67的有效阳性率分别为87.32%、100%、100%、98.59%和90.14%，差异有统计学意义（2=30.45，P<0.001）。固定24小时、48小时、96小时和7天组中，GFAP和Ki67的有效阳性率没有显著差异。结论不同固定时间对脑胶质瘤组织中GFAP和Ki67的免疫组化染色结果有影响。24h、48h、96h和7d的染色效果优于4h和14d。