间充质干细胞增强结直肠癌细胞可提高正常肠上皮细胞迁移能力并诱导上皮间质转化

作者:胡赢; 刘义; 韦成江; 朱亚珍; 赖浩; 冯雁; 林源
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目的:构建大肠癌细胞或间充质干细胞与正常结肠上皮细胞的体外共培养模型,体外模拟肿瘤微环境,探讨大肠癌细胞或间充质干细胞对正常结肠上皮细胞在体外共培养环境中迁移能力和上皮间充质转化的影响。方法:在Transwell细胞中建立结肠癌细胞株(SW480)、脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)或两者与上皮细胞(NCM460)正常结肠的体外共培养模型。根据共培养模型上下室接种的细胞,将其分为四组:a:空白对照组(无细胞),B:仅HUC MSCs,C:仅SW 480,d:HUC MSCs和SW 480混合接种。另一侧接种NCM460细胞,上下室接种细胞比例为11。观察NCM460共培养后的形态变化,通过划痕试验和Transwell试验检测NCM460迁移能力的变化。同时,Western blot检测了NCM460共培养后上皮间充质转化标志物的变化。Transwell迁移实验结果表明,与HUC-MSC或Aristotole 480共培养时,NCM460的迁移能力增强,Vimentin的表达显著增加(P<0.05),E-cadherin蛋白的表达和划痕愈合能力无明显变化。与MSCs和SW480同时共培养时,与空白对照组相比,NCM460细胞的划痕愈合速度和Transwell迁移能力显著增强,波形蛋白表达显著上调,E-cadherin蛋白表达显著下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:结肠癌细胞能提高正常结肠上皮细胞的迁移能力和上皮间充质转化标志物的表达。间充质干细胞的存在可以加强这一现象。