目的：探讨在高浓度肿瘤坏死因子（Tumor necrosis，factor－，TNF）诱导的炎症环境下，大鼠骨髓间充质干细胞（Rat）的线粒体自噬和成骨分化能力之间的相关性。方法：用100ng/ml碱性磷酸酶构建体外炎症微环境。探讨炎症微环境中线粒体自噬与成骨分化的相关性。实验分为t组（TNF-100ng/ml组）、T＋促进剂组（TNF-100ng/ml+雷帕霉素（Rapamycin）组）和T＋抑制剂组（TNF-100ng/ml+3甲基腺嘌呤（3MA）组）。在免疫荧光观察到线粒体自噬的变化。通过CCK－8和碱性磷酸酶（ALP）的活性测定和茜素红染色，检测线粒体自噬变化对细胞增殖和成骨分化的影响。通过RT-PCR和Western　Blot检测与成骨和自噬相关的基因和蛋白质在线粒体中的表达，以探讨炎症环境下线粒体自噬对成骨分化的影响。结果：TNF-100ng/ml成功构建了体外炎症微环境。Mito的共定位结果PCC的tracker和LC3显示t+启动子组优于T＋抑制剂组（P<0.05）。CCK－8和ALP的活性测定和茜素红染色结果显示，与T组相比，T＋促进剂组rBMSCs的增殖能力、ALP活性和钙结节矿化度增加，而T＋抑制剂组rBMSCs的增殖能力、ALP活性和钙结节矿化度降低（P<0.05）。RT-PCR和Western　Blot的结果显示，与T组相比，ALP和OPN表达量的骨相关蛋白和T+抑制剂基因显著降低，LC3II／LC3I、PINK1和Parkin的线粒体自噬相关蛋白显著降低，P62／SQSTM1显著升高（P<0.05）。与T组相比，ALP和OPN的T＋促进剂成骨相关蛋白和基因表达显著增加，LC3II／LC3I、PINK1和Parkin的线粒体自噬相关蛋白表达显著增加，P62／SQSTM1显著降低（P<0.05）。结论：在TNF-100ng/ml构建的体外炎症微环境下，rBMSCs线粒体成骨分化能力受到抑制，自噬能力下降。